激光掃描共聚焦顯微（wēi）鏡是（shì）采用激光作為光源，在傳統光學顯微鏡（jìng）基礎上采用共軛聚焦原理和裝置，並利用計（jì）算機對（duì）所觀察的對象進行數字圖象（xiàng）處理的一套觀察、分析和輸出（chū）係統。把光學成（chéng）像的分辨率提高了30%~40%，使用紫外或可見光激發（fā）熒光探針，從而得（dé）到細胞或組織內部微（wēi）細結構的熒光圖像，在亞細胞水平上（shàng）觀察生理信號及細胞形態的變化（huà），成為形態學，分子生物學，神經科學（xué），藥理學，遺傳（chuán）學等領域中新一（yī）代的研究工具。

1 激光掃描共聚焦（jiāo）顯微鏡的原理

從基本原理上講,共聚焦（jiāo）顯微鏡是一種現代化的光學顯微鏡,它對普通光鏡從技術上作了以下幾（jǐ）點改（gǎi）進:

1、采用點掃描（miáo）技術將樣品分解成二維或三維空間上的無數點,用十分細小的激光束(點光源)逐點逐行掃（sǎo）描成像,再通過微機組合成一個整體（tǐ）平麵的或立體的像。而傳統的光鏡是在場光源下一次成（chéng）像的,標本上（shàng）每一點的圖像都（dōu）會受到相鄰點的衍射光和散射光的幹擾。這兩種圖像的清晰（xī）度和精密度（dù）是無法相（xiàng）比的。

2、用計（jì）算（suàn）機采集和處理光信號,並利用光電倍增管放大信號圖

3、用激光（guāng）做（zuò）光源因為激光的單色性非常好,光源（yuán）波束的波長相同,從根（gēn）本上（shàng）消除了色差。

4、采用共聚焦（jiāo）技術在物（wù）鏡的焦平麵上放置了一個（gè）當中帶有小（xiǎo）孔的擋板,將焦平（píng）麵以外的雜散光擋住,消除了球差;並進一步消（xiāo）除了色差。

在共聚焦顯微鏡中,計算機代替了人眼或照相機（jī）進行觀察、攝像,得到的圖像是數字化的,可以在（zài）電腦中進行處理,再一次提高圖像的清晰度（dù）。而且利用了光電倍（bèi）增管,可以將很微弱的信號（hào）放大,靈敏度大（dà）大提高。由於綜合利用了以上技術。可以說ＬＳＣＭ是顯微鏡製作技術、光電技（jì）術、計（jì）算機技術（shù）的完美結合,是現代技術發展（zhǎn）的必然（rán）產物（wù）。

2 激光掃描（miáo）共聚焦顯微鏡（jìng）在生物醫學研究中的應用

目前,一（yī）台配置完備的ＬＳＣＭ在功能上（shàng）已經完全（quán）能夠取代以往的任何一種光學（xué）顯微（wēi）鏡,它相當於（yú）多種製作精良的常用光學顯微鏡的有機組合,如倒置光學顯微鏡、紫（zǐ）外線顯微鏡、熒光顯微鏡、暗視（shì）野顯微鏡、相差顯微鏡(ＰＨ)、微分幹涉差顯微鏡(ＤＩＣ)等,因此被稱為萬能顯微鏡,通過它所（suǒ）得到的精細圖像可使其他的顯（xiǎn）微鏡圖像無比遜色。

1、生化成分精確定（dìng）位觀察配合專用的分子（zǐ）探針,對於要檢測的成分不僅可以定位到細胞（bāo）

2、觀察活細胞、活組織ＬＳＣＭ在不損傷細胞的前提下,對活（huó）組織、活細胞進行觀察和測量，這不僅省去（qù）了繁瑣的樣品（pǐn）前期處理過程(如脫水、脫蠟、染色等);而且觀察過的（de）樣品還可以繼續用於（yú）其他的研（yán）究。這種功能對於細胞（bāo）培養、轉基因研究尤為重要。這可以說是ＬＳＣＭ最大（dà）的優勢。

3、定量測量首先（xiān）應用專一的（de）熒光探針對樣（yàng）品進行染色（sè）,樣（yàng）品的熒光強度和所（suǒ）測成分的含量呈（chéng）正比,如果其餘（yú）條件固定,通過對比（bǐ）各組（zǔ）樣品之間（jiān）的熒光強度值,可得出特定成分的（de）含量比。

4、動態觀察在同一樣品平麵上隨時（shí）間進行連續掃描（miáo）,就可分析細胞結構、內（nèi）含、和標記等動力學（xué）變化。目前在這方麵做得最多的是使（shǐ）用ＬＳＣＭ觀察（chá）心肌或平（píng）滑肌細胞內遊離鈣、鈉（nà）、鉀離子濃度或ｐＨ的動態變化。

5、數據、圖像的（de）數字化用計算機代替了普通的照相機,得到的圖像是數字化（huà）的,可及時輸出或長期儲存,而（ér）且還可進一步加工處理。