濾光片的原理(lǐ)、種類和選型
濾光片是在塑料或玻(bō)璃基材中加入特種染料或在其表麵蒸(zhēng)鍍光學膜製成(chéng),用以衰減(jiǎn)(吸收)光波中的某(mǒu)些光波段或以精確選擇小範圍波(bō)段光波通過,
而反射(或吸收)掉其(qí)他不希望通過的波段(duàn)。通過改變濾光(guāng)片的結構和膜層的光學參數,可以獲得各種光譜特性,使濾光片可以控製、
調整和改變光波的透射、反射、偏(piān)振或相位狀態。濾(lǜ)光片的分類方(fāng)法一般式按光譜波段、光譜(pǔ)特性、膜層材料(liào)、應用特點等特性進行分類。
濾光片按照光譜(pǔ)特性分類可以分為帶通濾光片(如NBF-808,BPF940等)截止濾(lǜ)光片(如IBG-650)、二(èr)向分光濾光片(如半透半反鏡)、
中性密度濾光片、反射濾光片等;濾光片按照光譜波段分類可以分為紫外波段濾光片、可見光濾光片和紅外波段濾光片;
濾光片(piàn)按照(zhào)應(yīng)用膜層材料分類可以分(fèn)為(wéi)軟膜(mó)濾光片和硬膜濾光片;濾光(guāng)片(piàn)按照應用特點分類可以分(fèn)為醫用生化儀用濾光片、
熒(yíng)光顯微鏡用濾光片、警用多波段硬膜(mó)濾光片等。
本文所談的濾光片指(zhǐ)的是各種熒光濾光片,濾光片一般用於各種顯微鏡中,使人們能夠更(gèng)方便(biàn)的觀(guān)測各種熒光現象。
濾光片通常用到(dào)的顯微鏡有熒光顯微鏡、
激光掃描共聚焦熒光顯微(wēi)鏡(LSCM)、共聚(jù)焦顯(xiǎn)微鏡、和全內反射(shè)熒光顯(xiǎn)微鏡(TIRFM)。
濾光片(piàn)的分(fèn)類方法:根據使用(yòng)目的(de)的不同,濾(lǜ)光片可分為TIRF濾光片、幹(gàn)涉濾光片、全(quán)內反射濾光片、Raman濾光片、拉曼濾光片、
FISH熒光濾光片和應原位(wèi)雜交濾光片。根據濾光片本身功能的不同,其(qí)可分為激(jī)發濾光片、發射濾光片、二向色(sè)鏡/二向色濾光片/
二色鏡、陷波濾光片(piàn)、燃料(liào)濾光片、熒光素濾(lǜ)光片、ND濾光片(piàn)、中性濾光片、中性灰(huī)度鏡、截止濾光片、高通濾光片、低通(tōng)濾光片(piàn)、
帶通濾光片、紫外濾光片和UV濾光片。
根據主要應用領域,濾光片又(yòu)可分為生(shēng)物濾(lǜ)光片、醫學濾光片和天文學濾光片。
熒光濾光片
用於生命科學和生(shēng)物醫學領域,主要作用是在生物醫學熒光檢驗分析係統(tǒng)中分離和選擇物質的激發光與發射熒光(guāng)的特征波段光(guāng)譜。
中性灰度鏡,ND,濾光片(piàn),中性灰度鏡(neutraldensityfilter)又叫(jiào)中灰(huī)密度鏡,其作用是均勻地(dì)過濾光(guāng)線。這種(zhǒng)濾光作用是非選
擇性的,也就是說,ND鏡對各種不同波長的光線的減少能力是同等的、均勻的,而對原物體的(de)顏色不會(huì)產生任何影響,可以真實
再現景物的反差。熒光原位雜交濾光片(piàn),FISH濾光(guāng)片
熒光原位雜交技術(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)是根據已(yǐ)知微生物(wù)不(bú)同分類級別上種群特異的DNA
序列,以利用熒光標記的特(tè)異寡聚核苷酸片段作為探針,與環境基因組中DNA分子雜交,檢測該特(tè)異(yì)微生物種群
的(de)存在與豐度。陷波濾光片,Notch濾光片陷波濾光片(piàn)通常用於拉曼光譜測試。通常也被稱作帶阻或者帶(dài)抑製濾光片。
它可(kě)以透過絕大多數波長,但是(shì)將特定波長範圍內(阻帶)的光衰減到非常低的水平(píng)。全內反射濾光片,TIRF濾光片,
全內反射熒光法濾光片用於全內反射(shè)熒光法(fǎ)顯微鏡,利(lì)用(yòng)全(quán)內反(fǎn)射產生的隱失波照(zhào)明樣品(pǐn)
使照明區(qū)域限定在(zài)樣品表麵的一薄層範圍內,從(cóng)而觀測到非常不易察覺的現象。優秀濾光片的特征:
1.和燃料的激發峰、發射峰匹配(pèi),且交疊小(xiǎo)
2.截止深度深
3.自(zì)發熒光小
4.透(tòu)鏡麵形好,利於熒光成像的提取。如果透鏡表麵的平整(zhěng)度不好,則會產生波前(qián)扭矩(jǔ)或楔角,波(bō)前(qián)扭矩會改變聚(jù)焦或成像位置,
一般透射波前扭矩(TWD)比反射波前扭矩(RWD)對(duì)成像(xiàng)的影響更加直接(jiē),也會有更嚴格的要求。
濾光片(piàn)的原理:
熒光濾光片一般(bān)采用單片無色透(tòu)明的玻璃作為基底,
在玻璃的兩個表麵鍍(dù)膜。
增反膜的厚度會選擇為半波長的整數倍,此(cǐ)時(shí)反射疊加增強;增透膜的厚(hòu)度為(wéi)1/4波長的倍數,此時投射疊加增強。濾光片的激發和成像(xiàng)方式
熒光濾光片的(de)激(jī)發和成像(xiàng)方式大體可分為如下三種:聚焦型:入射(shè)激發光聚焦在(zài)待測樣品(pǐn)上;寬場型:入射激(jī)發光束以較大的麵積打到樣品上
全內反射(shè)型(TIRF):激發光透過樣品,觀測倏逝(shì)波成像